Puurijärvi -Isosuon kansallispuisto sijaitsee Helsinki - Pori -tien (valtatie 2) pohjoispuolella ja Turku - Tampere -tien (valtatie 12) länsipuolella molempien teiden välittömässä läheisyydessä. Puurijärvelle ja Isosuolle on Porista matkaa 65 km, Tampereelta 75 km, Turusta 104 km ja Helsingistä 196 km.

Eri reiteille pääsee eri puolilla kansallispuistoa sijaitsevilta pysäköintialueilta.